Enzim Tahlili (enzyme assay)

Enzim tahlilleri, enzimatik aktiviteyi ölçmek için kullanılan laboratuvar yöntemleridir. Enzim kinetiği ve enzim inhibisyonunun incelenmesi için hayati öneme sahiptirler.

Enzim birimleri: Bir enzimin miktarı veya konsantrasyonu, diğer herhangi bir kimyasalda olduğu gibi molar miktarlarda veya enzim birimlerindeki aktivite açısından ifade edilebilir.

·         Enzim aktivitesi: Enzim aktivitesi mevcut aktif enzim miktarının bir ölçüsüdür, dolayısıyla belirtilmesi gereken çeşitli fiziksel koşullara bağlıdır.

·         Spesifik aktivite: Bir enzimin spesifik aktivitesi, toplam proteinin miligramı başına bir enzimin aktivitesidir. Spesifik aktivite, karışımdaki enzim saflığının bir ölçümünü verir.

·         İlgili terminoloji: Bir reaksiyonun hızı, birim zaman başına kaybolan substratın (veya üretilen ürünün) konsantrasyonudur.

Tahlil türleri: Tüm enzim analizleri ya substrat tüketimini ya da zaman içindeki ürün üretimini ölçer. Substratların ve ürünlerin konsantrasyonlarını ölçmek için çok sayıda farklı yöntem mevcuttur, birçok enzim, birkaç farklı yolla test edilebilir.

Sürekli analizler: Sürekli analizler en uygun olanıdır; tek bir analiz, daha fazla çalışmaya gerek kalmadan reaksiyon hızını verir. Sürekli analizlerin birçok farklı türü vardır.

Süreksiz analizler: Süreksiz analizler, bir enzim reaksiyonundan numunelerin aralıklarla alınması ve bu numunelerde ürün üretimi veya substrat tüketiminin ölçülmesidir.

Analizleri etkileyen faktörler: Tahlil sonucunu çeşitli faktörler etkiler. Yakın tarihli bir incelemede, bir tahlili çalışır durumda tutmak için izlenmesi gereken çeşitli parametreler özetlenmiştir. Tipik bazı örnerkler arasında, başlangıç hız deneyleri, ilerleme eğrisi deneyleri, geçici kinetik deneyler, gevşeme deneyleri sayılabilir.


(a) Enzim aktivite analizinin basitleştirilmiş bir açıklaması (researchgate),(b) enzim üniteleri (medicilon)

 

https://en.wikipedia.org/wiki/Enzyme_assay

15 Temmuz 2024

 

GERİ (biyoloji)